ArcticZymes社概要
ArcticZymes社では主に北極海生物由来の酵素を開発・販売しております。
製品は工程に最適化されており、作業の効率化を図れます。また、すべての製品がノルウェーのISO13485認証取得工場で製造され、厳密な品質管理を受けています。
ArcticZymes社製品概要
ArcticZymesプロテイナーゼ
ArcticZymesプロテイナーゼは、北極海の海洋微生物由来の非特異的エンドペプチダーゼです。基質特異性が広く、使用後の失活が容易です。
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タラウラシル-DNAグリコシラーゼ（COD UNG）
タイセイヨウダラ由来のタラウラシル-DNAグリコシラーゼ（COD UNG）は、適度な熱処理によって完全かつ不可逆的に不活性化される唯一の市販UNG酵素です。
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主な使用用途
PCRキャリーオーバー防止
PCR（特に定量PCR）は高感度であるがゆえに汚染されやすく、誤りや不正確な結果が生じます。今までのPCRから持ち越された（キャリーオーバー）汚染物質は、偽陽性結果が出る主な原因です。
Cod UNGは、市販のワンステップRT‐qPCRマスターミックスにおいてキャリーオーバー汚染を防止できる唯一のUNGです。
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二本鎖特異的デオキシリボヌクレアーゼ
dsDNaseおよびHL-dsDNaseは、二本鎖DNA特異的かつ熱に不安定なエンドヌクレアーゼです。これらの特性により、ゲノムDNAが問題となるアプリケーションで特に有用です。
用途ごとに簡単に使用できるキットが2種類あります。
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主な使用用途
RNA調製物からのゲノムDNAの除去
RNAの検出と定量は、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（RT-PCR）および定量RT-PCR（RT-qPCR）によって行われます。これらの方法は分子研究や臨床診断で広く使用されていますが、cDNAとゲノムDNAの増幅を区別することはできません。これにより、偽陽性の結果が生じたり、RT-qPCRの場合、RNA量の推定を誤る可能性があります。
RNAから汚染ゲノムDNAを除去する最も一般的な方法は、DNase I処理です。Heat＆Run gDNA除去キットを用いると迅速に処理いただけます。
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PCRマスターミックスの除染
PCRで使用されるポリメラーゼは、大腸菌DNAで汚染されていることが多いため、少量の細菌DNAを標的とする場合、汚染されたDNAが感度を低下させ、偽陽性を引き起こすことがあります。この問題を解決するために、ArcticZymesはPCR感度を低下させることなくマスターミックス中の汚染DNAを除去する簡単で正確なPCR除染キットを開発しました。
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二本鎖特異的デオキシリボヌクレアーゼのキット
・PCR除染キット
PCR除染キットは、PCR感度を低下させることなく、PCRマスターミックス内の汚染DNAを除去します。
特徴
- dsDNaseの二本鎖特異的特性により、プライマーとプローブの汚染を除去できる
- エンドポイントPCRとプローブを用いる定量PCRに効果的
- コンタミネーションしている細菌DNAは検出限界以下の量まで減少する
- 手順が高速かつ簡単
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・Heat＆Run gDNA除去キット
このキットには、定量RT-PCRを実行する前にRNAプレップからgDNAを効率的に除去するHL-dsDNaseが含まれています。
特徴
図1：Heat＆Runプロトコル（同一チューブ内で行う）
- gDNAが除去され、RNAは同じチューブ内で逆転写できる（図1）。
- 熱に不安定なdsDNaseは簡単に失活する
- この手順により、ピペッティング工程にかかる時間が最小限になり、手動で作業する時間が短縮される
- Heat＆Runキットは、ハイスループット実験に特に適している
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高塩濃度耐性ヌクレアーゼ(バイオプロセスグレード) SAN HQ
SANは、中程度および高塩濃度のバッファー中のDNAおよびRNAを除去する優れた酵素です。幅広い塩濃度(NaClおよびKCl)で活性を保持し、SANはタンパク質サンプル中の核酸を分解し、粘度を下げます。非特異的であるため様々なワークフローにおいて作業の効率性と生成物の収量の向上に貢献します。
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主な使用用途
ウイルスバイオプロセシング
ウイルス製造において、複数の血清型、細胞株、培地で高いウイルス力価を確保するためには、最適な塩濃度が極めて重要です。理由の1つとして、いくつかの種のウイルスのカプシドの表面電荷が高く、残存DNAと結合する傾向が強くなることでウイルスベクターが凝集し、最終的にウイルス力価が低下することがあげられます。
SAN High Qualityは、高塩濃度（300〜600 mM）で最適な活性を示し、核酸を効率的に除去します。
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M-SAN高品質ヌクレアーゼ（M-SAN HQ）
M-SAN HQは、高耐塩性ヌクレアーゼ製品群の最新製品です。M-SAN HQは、生理食塩濃度に近い状態での核酸の除去の最適解として開発され、広いpH範囲に活性を示します。約175mMの塩濃度で最適活性を示します。
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HL-SAN
HL-SANは、高塩濃度で最適活性を有する非特異的エンドヌクレアーゼです。HL-SANはさまざまな緩衝液中で活性を示し、還元剤で処理することで容易に失活します。これらの特徴から、HL-SANは、特にタンパク質の精製および分子生物学試薬からDNAやRNAを除去することへの使用が適しています。
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主な使用用途
タンパク質精製
核酸（特にゲノムDNA）は時々DNA結合タンパク質の精製時に、精製、下流の分析や作業を妨げ問題を引き起こします。ヌクレアーゼ活性は通常除去が困難ですが、HL-SANは失活や分離が容易です。これにより、以降の作業で残存ヌクレアーゼ活性を伴わないヌクレアーゼ処理が可能になります。
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IsoPol™DNAポリメラーゼ
5′-3 ‘ポリメラーゼに対して活性を示し、3’-5’エキソヌクレアーゼに対する活性はありません。また、5’-3’エキソヌクレアーゼ領域が切断されているため、5’-3’エキソヌクレアーゼ活性も欠きます。IsoPol™DNA Polymeraseには、優れた加工性と強力な立位変位活性があります。加えて、室温で活性を示し、50°Cを超える温度で失活します。
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IsoPol™ SD+
IsoPol™SD
+は、IsoPol™と比較して、より強い鎖置換と高い耐塩性を備えたDNAポリメラーゼです。
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IsoPol™ BST+
IsoPol™BST
+は、鎖置換活性が強化された耐熱性ポリメラーゼ（大きな断片）です。IsoPol™BST
+は25〜65℃で有効です。5′-3′-および3′-5′-エキソヌクレアーゼ活性を欠きます。
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T4 DNAリガーゼ
T4DNAリガーゼは、ATPおよびMg2+依存性dsDNAリガーゼです。二本鎖DNA、二本鎖RNAおよびいくつかのDNA/RNAハイブリッドにおける3′-ヒドロキシルおよび5′-リン酸末端間のホスホジエステル結合の形成を触媒します。T4DNAリガーゼは平滑末端基質と凝集末端基質の両方で活性を示します。
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エビアルカリホスファターゼ（SAP）
シュリンプアルカリホスファターゼ（SAP）は、短時間の熱処理で完全に不活化する利便性の高いDNA修飾酵素です。
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主な使用用途
PCR産物の清掃
SAPは、配列決定または遺伝子型決定の前にPCR産物からヌクレオチドおよびプライマーを簡単かつ効果的に除去します。エキソヌクレアーゼIと併用すると効果的です。
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クローニング前の脱リン酸化
ベクター自体が再結合を防ぐためにDNA末端を脱リン化することが推奨されていますが、クローニング手順およびホスファターゼ処理は煩雑であり、間違いを起こしやすいという欠点があります。SAPは単純な熱失活工程により酵素を完全に除去することができ、かつ、制限酵素に用いられるすべての緩衝液中で活性です。そのためこの手順に適しています。
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DNAの完全な除去
典型的な細胞溶解物には、DNA、RNA、ヌクレオチド結合タンパク質、脂質、界面活性剤などが含まれており、最適なDNA含有反応バッファーよりも組成が複雑です。したがって、細菌溶解物からDNAを完全に除去するには、緩衝液に用いる場合よりも一般的に多くのSANが必要です。
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粘度低下
SANは大腸菌細胞溶解物からDNSを効率的に除去します。溶解物にNaClを添加しない場合はNaClが添加された溶解物よりも長い反応時間またはより多量のSANが必要です。
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HL-Exol
HL-ExoIは、一本鎖DNAに特異的な3′-5 ‘エキソヌクレアーゼです。25°C以上の温度で活性であり、80°Cで1分間のインキュベーション、または60°Cで15分間のインキュベーションによって失活します。
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